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無色桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書

簡要描述:無色桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關產品:CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞)小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記)

SOC肉湯/SOC BrothBR250克國產/進口

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeU-937(

  • 產品型號:50次
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-16
  • 訪  問  量:379

詳細介紹

注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

產品名稱

英文名稱

貨號

 無色桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書

 Achromobacter spp.PCR

BK-P8748

原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環(huán)擴增,擴增產物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基/5% Dextrose Broth Medium藥品細菌培養(yǎng),滴眼劑金黃色葡萄球菌培養(yǎng)等250克國產/進口

大鼠腸靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基100mL

A9(小鼠下結締組織細胞)5×106cells/瓶×2

亮白曲霉 Aspergillus candidus小鼠成骨細胞*培養(yǎng)基

PANC-1, 人胰腺細胞豇豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium vigna

糖膽發(fā)酵管培養(yǎng)基/Lactose Bile Broth用于大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌的測定250克國產/進口

沙氏BHI瓊脂/沙氏腦心浸瓊脂/Sabouraud BHI Agar真菌檢測250克國產/進口

Lane Marker Loading Buffer(5x)/蛋白示蹤上樣緩沖(還原,5x)5ml5ml

CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞)小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記)

SOC肉湯/SOC BrothBR250克國產/進口

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeU-937(人組織細胞淋巴瘤細胞)

無色桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis核側耳 Pleurotus tuber-regium

冬擬多孔菌吳茱萸堿

枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilishDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞

HBL-100(人整合SV40基因的腺上皮細胞)煙曲霉 Aspergillus fumigatus

酸球菌霍氏亞種 Lactococcus lactis subsp. hordniae大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium melilotiLLC(小鼠肺細胞)

Saos-2,人成骨瘤細胞泡盛曲霉 Aspergillus awamori

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus嗜熱脂肪芽胞桿菌 Bacillus thermophilus

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipesHCG803/胃細胞

蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)黑曲霉 Aspergillus niger

泡盛曲霉 Aspergillus awamori大鼠卵巢上皮細胞*培養(yǎng)基

百脈根根瘤菌 Rhizobium loti酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris

Molt-4/急性淋巴母細胞白血病細胞阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii

炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius小鼠肝星形細胞*培養(yǎng)基

雪白小四孢菌 Microtetraspora niveoalba寡養(yǎng)單胞菌 Stenotrophomonas sp.

技術原理:
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。

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