當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > PCR試劑盒 > PCR檢測試劑盒 > 50次牛腸道病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格
簡要描述:牛腸道病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)重組蛋白英文名稱:Recombinant Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6)GBC-SD(人膽囊細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
詳細(xì)介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛腸道病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 | Bovine Enterovirus(BEV)RTPCR | BK-P8907 |
?
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Intelectin 1 (ITLN1)
改良克氏雙糖培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的鑒定
大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠腎足突細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
豌豆瘤菌 Rhizobium leguminosarum帚石南棒桿菌 Corynebacterium callunae
MS751(人頸表細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酪蛋白瓊脂 規(guī)格: 100g 用途: 用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗(yàn) (GB/T4789.28-2003中4.65,GB/T4789.14-2003)。
Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SHG-44 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)丁酸梭菌 Clostridium butylicom
血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)重組蛋白英文名稱:Recombinant Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6)
GBC-SD(人膽囊細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
牛腸道病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格米勒-海頓肉湯/M湯/酪蛋白肉湯/水解酪蛋白肉湯/MHB用于抗菌素藥物敏感性試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
燕麥鐮刀菌 Gibberella avenacea球型芽孢桿菌 Bacillus sphaerious
NCI-H1975(人肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人腺細(xì)胞 MX-1
胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖)10mL
真姬菇 Hypsizigus marmoreusWM451, 人色素瘤細(xì)胞
光帽鱗傘 Pholiota nameko熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
綠色木霉 Trichoderma viride鏈霉菌 Streptomyces sp.
卵黃鈉瓊脂培養(yǎng)基/Egg-Yolk Salt Agar金黃色葡萄球菌的選擇性分離250克國產(chǎn)/進(jìn)口
負(fù)鼠腎細(xì)胞 OK
PLC/PRF/5(人肝亞力山大細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
產(chǎn)品咨詢
聯(lián)系我們
上海帛科生物技術(shù)有限公司 公司地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661 號(hào)24棟 技術(shù)支持:環(huán)保在線掃一掃 更多精彩
微信二維碼
網(wǎng)站二維碼