注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

?
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

霉素瓊脂基礎/霉菌鑒別瓊脂基礎/AFPA霉菌分離培養(yǎng)250克國產/進口

香菇 Lentinula edodes葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

爪哇霉無花果曲霉變種 Aspergillus ficuum var.

人回盲腸細胞英文名稱：HCT-8

MKN45(人胃細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠外周血白細胞*培養(yǎng)基SNU-5(人胃細胞)

大鼠胰島素細胞貴州綠僵菌 Metarhizium guizhouense

假單胞菌瓊脂基礎培養(yǎng)基/CN瓊脂 規(guī)格： 250g 用途： 用于飲用天然礦泉水檢驗中銅綠假單胞菌的測定。（GB/T 8538-2008）

BCA蛋白定量試劑盒500次國產

牛膽粉/牛膽汁粉/牛膽抽提/Bile powder of cowBR，40%100克國產/進口

菜豆瘤菌 Mesorhizobium phaseoli糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

巴氏阿米巴原蟲PCR檢測試劑盒廠家3-吡唑  83.09  3- amino group*：1820-80-0分子量： C3H5N3

3-(2-吡)甲醛  183.21  3- (2-) Ben Jiaquan*：85553-53-3分子量： C12H9NO

2-甲氧吡  109.13  2- methyl group*：1628-89-3分子量： C6H7NO

三(N-叔丁-3,5-二)鉬  624.81  Three (N- tert butyl -3,5- two*：236740-70-8分子量： C36H54MoN3

5-溴-4-氯-3-吲哚神經(jīng)氨  5- -4- -3- - - -  559.72分子量： C19H21BrClN2O9Na*：160369-85-7

2-氯-3-氟吡  131.54  2- chloride -3-*：17282-04-1分子量： C5H3ClFN

4-乙炔聯(lián)  178.23  4- acetylene*：29079-00-3分子量： C14H10

2,6-二氯吡  147.99  2,6- two*：2402-78-0分子量： C5H3Cl2N

2-溴-4-噻唑  240.12  2- bromo -4- phenylthiazole*：57516-16-2分子量： C9H6BrNS

2-氟吡-4-甲醛  125.1  2- -4- formaldehyde*：131747-69-8分子量： C6H4FNO

黃芪皂苷II  Astragalus saponin II  798.95分子量： C41H66O15*：84676-89-1

技術原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。