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簡要描述:貝氏貝諾孢子蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:人參皂苷F1 CAS 53963-43-2 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg圣草素-7-0-葡萄糖甙 CAS * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg新橙皮苷二氫查爾 CAS 20702-77-6 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
詳細(xì)介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
貝氏貝諾孢子蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Besnoitia besnoitiPCR | BK-P8874 |
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯 CAS 218916-52-0 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
知母皂苷B CAS 139051-27-7 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
路路通酸 CAS 4481-62-3 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
人參皂苷F1 CAS 53963-43-2 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
圣草素-7-0-葡萄糖甙 CAS * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
新橙皮苷二氫查爾 CAS 20702-77-6 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
桂酸 CAS 140-10-3 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
柴胡皂苷C CAS 20736-08-7 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
紅花苷I CAS 94238-00-3 * 規(guī)格: HPLC≥97%;20mg
表沒食子兒茶素 CAS 970-74-1 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
芹菜素 CAS 520-36-5 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
防己諾林堿 CAS 33889-68-8 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
秦皮素 CAS 574-84-5 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
胸腺 CAS 65-71-4 * 規(guī)格: 20mg
苦瓜苷A CAS 75801-95-5 * 規(guī)格: 10mg
貝氏貝諾孢子蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格聯(lián) 154.21 Biphenyl*:92-52-4分子量: C12H10
3--4-甲氧三氟甲 191.15 3- amino -4- three f*:349-65-5分子量: C8H8F3NO
三環(huán)唑 189.24 Three ring*:41814-78-2分子量: C9H7N3S
N,N'-雙(水醛縮)乙二胺鐵 322.15 N, N'- bis (salicylidene) ethylenediamine iron*:14167-12-5分子量: C16H14FeN2O2
過氧雙(2,4-二氯甲酰) 380.1 Peroxide bis (2,4- two)*:分子量: C14H6O4CL4
4-羧-2,2,6,6-四甲1-氧自由 200.26 4- -2,2,6,6- four 1- carboxyl methyl piperidine oxygen radicals*:37149-18-1分子量: C10H18NO3
天青A Azure A 625.68分子量: C16H18N3S · C15H1<*:37247-10-2
健那綠 Health that green 511.06分子量: C30H31ClN6*:2869-83-2
Hanks’BalancedSalts Hanks equilibrium salt 分子量:*:N#A2968
氯鋰 60.41 Lithium chloride*:16712-20-2分子量: ClH2LiO
二氫石蒜堿 Two Shi Suanjian 289.32636分子量:C16H19NO4*:6271-21-2
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