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簡要描述:中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:牛肝顆粒 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:100g 運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌T培養(yǎng)基 英文名稱:Zymomonas Mobilis T Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(不含瓊脂) 英文名稱:Silicate bacteria medium(without Agar) 產(chǎn)品規(guī)格:250g 硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(含瓊脂) 英文名稱:Silicate
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注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6712
產(chǎn)品分類:蔗糖系列
商品介紹:
測定意義: 蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。 NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中,負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。 測定原理: NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計(jì)算NI活性 自備用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
2 ug pNTAP-Mef2a pNTAP-Mef2a 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
硝酸鹽肉湯(還原) 20支
1瓶 U14-GFP細(xì)胞株 U14-GFP 低溫運(yùn)輸和保存
D/E中和瓊脂 D/E Neutralizing Agar 250g
100mg D- 果糖 -6- 二鈉 D-Fructose -6-Phosphate -20℃保存
50T (OC43/HKU1)PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
30µL α-Actin小鼠單抗 α-Actin Mouse MAb -20℃保存
2 ug YFP-Membrane YFP-Membrane 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2mL 氨基磁珠 Magnetic beads,Amino 4℃密閉、豎直保存
2 ug pEYFP pEYFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
50次 柱式植物油DNAout Column Plant Oil DNAOUT 4℃保存
中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒可見分光光度法NPTX2 神經(jīng)細(xì)胞穿透素2抗體 規(guī)格: 0.2mlS-100/S100A1 S100A1抗體 規(guī)格: 0.1ml
TRH 促甲狀素釋放激素抗體 規(guī)格: 0.1mlMcl1/BCL2L3 髓樣分化蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Dermokine beta Dermokine β蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlFER/TYK3 酪蛋白激3抗體 規(guī)格: 0.2ml
EGFRvIII 表皮生因子受體III型突變體抗體 規(guī)格: 0.1mlGLUT2 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
RASSF3 Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 規(guī)格: 0.2mlZNF231/Bassoon 鋅指蛋白231抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1mlVAMP-1/Synaptobrevin-1 VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
FAM156A/TMEM2 跨膜蛋白29抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG 兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 1mg
PRSS10/TMPRSS2 絲蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2mlPHKA1 磷酸激α1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Cytoglobin 細(xì)胞球蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlRALA+RALB Ras樣蛋白A+B抗體 規(guī)格: 0.2ml
GRK2/BARK1/ADRBK1 G蛋白偶合受體激2抗體 規(guī)格: 0.1mlE3 ubiquitin ligase/RNF218 E3泛素連接抗體 規(guī)格: 0.2ml
CLDND1 膜蛋白CLDND1抗體 規(guī)格: 0.1mlCYP11B2 醛固酮合成CYP11B2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Cytokeratin 5/CK5 細(xì)胞角蛋白5抗體 0.1mlFLAP/5-lipoxygenase activating protein 5脂氧合激活蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
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