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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 抑氨肽酶(進口)質量規(guī)格：>99%,美國進口sc-202975Bestatin,Ubenimex

人軟骨細胞HC-a高藜蘆酸(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98.0%(3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid

羅猴胎腎細胞;MA104 腦膠質瘤細胞，C6細胞 NCI-H446 [H446](小細胞肺癌細胞)二乙酰一1(>98%，BR)質量規(guī)格：>98%，BRDiacetyl monoxime

人前列腺癌細胞;DU 145 [DU145;DU-145]馬來酸二乙酯(>98%，BR)質量規(guī)格：>98%，BRDiethyl maleate

TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 人細胞裂解液 (陽性對照) 二氫細胞弛素(>98%，BR)質量規(guī)格：>98%，BRDihydrocytochalasin B
WM35, 人色素瘤細胞胸腺五肽質量規(guī)格：>98%Thymopentin Acetate

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸噻加賓 質量規(guī)格：≥99.0%,BRTiagabine HCl

人皮膚成纖維樣細胞;HSF2特比萘芬質量規(guī)格：>98.5%Terbinafine

豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS5 大鼠肝細胞，BRL 3A細胞 NBLE細胞，新生牛眼晶體上皮細胞特比萘芬（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Terbinafine

人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1鹽酸特比萘芬質量規(guī)格：>99%,EP6Terbinafine HCl
KM小鼠未分化神經(jīng)膠質瘤瘤株;B22草酸脫氫氨氯地平質量規(guī)格：美國進口Dehydro Amlodipine Oxalate

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr 腹水瘤細胞，S-180細胞 SVEC4-10細胞，小鼠結血管上皮樣細胞(R)-氨氯地平質量規(guī)格：美國進口(R)-Amlodipine

人永生化表皮細胞;HaCaT阿瑞匹坦-標記d4質量規(guī)格：美國進口Aprepitant - Labeled d4

CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿瑞匹坦-M3代謝物質量規(guī)格：美國進口Aprepitant-M3 Metabolite

猞猁皮膚成纖維樣細胞;ELS1OSI-420，游離堿（去甲埃羅替尼）質量規(guī)格：美國進口OSI-420, Free Base (Desmethyl Erlotinib)
載脂蛋白EApoE試劑盒人上皮細胞總RNAHMEpiC NA聚酰胺粉(柱層析用，10-30目)Polyamide質量規(guī)格：柱層析用，10-30目

CTSL1 Others Mouse 小鼠 CTSL / Cathepsin-L 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸氫二鈉,二水(for HPLC, ≥99%(T)) phosphate dibasic dihydrate質量規(guī)格：for HPLC, ≥99%(T)

HCT-15 人結腸癌細胞無水硫酸鈉(農殘級) sulfate anhydrous質量規(guī)格：農殘級

CL-0401NCI-H446(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2無水硫酸鈉(for HPLC,≥99.0%(T)) sulfate anhydrous質量規(guī)格：for HPLC,≥99.0%(T)

MSC, 小鼠雪旺細胞碳酸氫鈉(for HPLC,≥99.0%) bicarbonate質量規(guī)格：for HPLC,≥99.0%
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。