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產品名稱 | 顯色法,通用型 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | BK-S64127 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人細胞裂解液 (陽性對照) 偏釩酸銀(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BRSilver metavanadate
人成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL銀粉(200目)(>99.5%,EP)質量規(guī)格:>99.5%,EPSilver powder
HS-4細胞,人皮膚癌細胞系 鼠傷寒沙門氏菌Ta97 雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G125-硝基愈創(chuàng)木酚鈉(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BR 5-nitroguaiacolate
XCL1 Protein Canine 重組狗 XCL1 蛋白 (His 標簽)苯亞磺酸鈉(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BR benzenesulfinate
ME-180(人頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細胞裂解液 (陽性對照) 氯化血紅素;血晶素質量規(guī)格:0.98Hemin
倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C111酸氫鈣二水(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BRCalcium phosphate, dibasic, dihydrate
XCL2 Others Human 人 XCL2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 碳酸鈰質量規(guī)格:>99.9%,ARCerium(III) carbonate, hydrate
CM-R118大鼠虹膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基100mL文多靈質量規(guī)格:>98%,BRVindoline
HNE2, 人鼻咽癌細胞系 NIH SWISS小鼠胚細胞,NIH3T3細胞 A673(橫紋肌瘤細胞)羅丹明B;玫瑰紅B質量規(guī)格:BSRhodamine B
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1頭孢哌酮;頭孢哌酮酸質量規(guī)格:>98%,BRCefoperazone Acid
大鼠骨髓瘤細胞;Y3-Ag 1.2.3 肺腺癌細胞,SPC-A-1細胞 B/c-ES細胞,BALB/c小鼠ES細胞CETYLDImetxYLetxylAMMONIUMBROMIDE十六烷基二化高級白色粉末RTsigma
QGY-7701, 人肝癌細胞 Human2′-脫氧肌苷-5′-... 2′-Deoxyinosine 5′-monophosphate sod... 14999-52-1 5MG 通用試劑
IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,6-己二醇二炳1醋酯 Hqxcmqthylqnq diccrylctq 13048-33-4
人骨髓間充質干細胞HMSC-bmBROMOpxenOLBLUE溴酚藍ACS級粉色至紅色結晶粉末RTsigma
IL12B Others Marmoset 狨猴 IL12B / IL-12B 人細胞裂解液 (陽性對照) 1994-8-6對本乙酯etxyl 4-metxylbenzoate
顯色法,通用型人腎近曲小管上皮細胞總RNAHRPTEpiC NA苦玄參苷X(標準品)Picfeltarraenin X質量規(guī)格:HPLC≥97%,標準品
BST1 Others Rat 大鼠 CD157 / BST1 人細胞裂解液 (陽性對照) 豆甾醇葡萄糖苷(標準品)Stigmasterol glucoside質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人滑膜細胞*培養(yǎng)基 100mL新霉胺(標準品)Neamine 質量規(guī)格:檢查
CHO-pt細胞,轉血小板基因倉鼠卵巢細胞 L6(大鼠成肌細胞) 615小鼠癌瘤株;Ca761醌式利福平(標準品)RIFAMPIN QUINONE 質量規(guī)格:HPLC法有關物質檢查
EFNA4 Protein Human 重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標簽)3-甲酰利福霉素SV(標準品)Rifamycin質量規(guī)格:含量
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
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