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游離脂肪酸含量(FFA)測試盒微量法

簡要描述:游離脂肪酸含量(FFA)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:抗生素檢定培養(yǎng)基3號(usp) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 抗生素檢定培養(yǎng)基1號(PH6.5-6.7) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 抗生素檢定培養(yǎng)基1號(低PH) 英文名稱:Antibiotic Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 抗生素檢定培養(yǎng)基4號(PH6.5-6.6) 英文名稱:Antibiotic Agar No.4 產(chǎn)品規(guī)格:2

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-26
  • 訪  問  量:683

詳細介紹

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

游離脂肪酸含量(FFA)測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6637

商品介紹:

測定意義:

游離脂肪酸,也稱為非酯化脂肪酸,在與白蛋白結(jié)合的血漿中循環(huán)。動物血液中的游離脂肪酸 (FFA )含量是一項重要的生理生化指標。血清中游離脂肪酸的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān),游離脂肪酸的濃度會因為糖尿病、重癥肝障礙、甲狀腺功能亢進等疾病而上升。測定原理:

用有機溶劑萃取FFA。含有FFA的有機液與三乙醇胺銅反應(yīng),在有機相中形成脂肪酸銅 (銅皂) FFACu。Cu離子與顯色液反應(yīng)形成紫紅色絡(luò)合物。反應(yīng)形成的顏色深淺與Cu離子濃度的關(guān)系符合朗伯一比爾定律,因此可利用此反應(yīng)進行比色。

自備的儀器和用品:

可見分光光度計、離心機、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

2 ug pEF1a-hyPBase pEF1a-hyPBase 低溫運輸,-20℃保存

BLB瓊脂 BLB agar 250g

5g  Tetracycline Hydrochloride 室溫干燥保存

50T 芝麻PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

2 ug pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative control pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative control 低溫運輸,-20℃保存

100mL Hybridization Solutions in SSPE  Hybridization Solutions in SSPE  常溫保存

1.5mL 即用型高保真PCR試劑盒 Instant HiFi PCR Mix -20℃保存

2 ug pLV-aMHC Puro pLV-aMHC Puro 低溫運輸,-20℃保存

改良GAM瓊脂抑菌劑  1ml*5

1瓶 NCI-H226細胞株 NCI-H226 低溫運輸和保存

葡萄糖肉湯 Dextrose Broth 250g

游離脂肪酸含量(FFA)測試盒微量法EKLF/KLF1, 2, 4  上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體 規(guī)格: 0.2ml

FAM71A  FAM71A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-human IgG  羊抗人IgG 規(guī)格: 1mg

PLGF  胎盤生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

PBLD/MAWBP  MAWD結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

14-3-3 zeta/delta  14-3-3 protein ζ/δ抗體 規(guī)格: 0.1ml

DUSP1/MKP1  絲裂原活化蛋白激磷酸-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CACH6/Cav2.3  L型鈣通道蛋白a1亞型6抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1ml

T3  三碘甲狀素T3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cyclin D1/FSTL3  周期素D1抗體 規(guī)格: 0.1ml

C1orf163  1號染色體開放閱讀框163抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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