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簡(jiǎn)要描述:丙酮酸脫氫酶(PDH)測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:氯化血紅素 英文名稱:hemin 產(chǎn)品規(guī)格:1g K1 英文名稱:vitamin K1 產(chǎn)品規(guī)格:1g 莫鋰鹽 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5mg/支*5支/包 莫鋰鹽改良MRS培養(yǎng)基 英文名稱:Li-Mupirocin MRS Medium,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g
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注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:丙酮酸脫氫酶(PDH)測(cè)試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測(cè)方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6578
產(chǎn)品分類:三羧酸循環(huán)系列
商品介紹:
測(cè)定意義: PDH(EC 4.1.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是丙酮酸脫氫酶復(fù)合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,催化丙酮酸脫梭生成-TPP,把糖酵解和三羧酸循環(huán)連接起來(lái)。 測(cè)定原理 PDH催化丙酮酸脫氫,同時(shí)還原WST-8產(chǎn)生黃色物質(zhì),從而導(dǎo)致450nm光吸收的增加。 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
1瓶 A7r5細(xì)胞株 A7r5 低溫運(yùn)輸和保存
含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)顆粒 300ml*10
100次 人甲基化/非甲基化DNA標(biāo)準(zhǔn)品 Human Methylated/Non-methylated DNA Standard 4℃保存
250mL MOPS Buffer,1.0M,pH5.5 MOPS Buffer,1.0M,pH5.5 常溫保存
150mL 丙烯葡聚糖凝膠 S-500 HR Sephacryl S-500 HR 室溫保存
2 ug pMET A pMET A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
YSG培養(yǎng)基基礎(chǔ)(日本標(biāo)準(zhǔn)) 250g
1瓶 SH3細(xì)胞株 SH3 低溫運(yùn)輸和保存
葡萄球菌選擇性瓊脂110 Staphylococcus Selective Agar 10 250g
50g 葡聚糖 Dextran 室溫保存
50T 大豆RR PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
丙酮酸脫氫酶(PDH)測(cè)試盒可見分光光度法MTMR14 肌管素相關(guān)蛋白14抗體 規(guī)格: 0.2ml
USP10 去泛素10抗體 規(guī)格: 0.2ml
CNDP1 肌肽二肽1抗體 規(guī)格: 0.1ml
PIRH2 泛素連接抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD30/TNFRSF8 CD30抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/AP 堿性磷酸(AP)標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格: 0.1ml
Tubb3/Tubulin beta 3 微管蛋白β3抗體 規(guī)格: 0.1ml
C2orf43 2號(hào)染色體開放閱讀框43抗體 規(guī)格: 0.2ml
LRRTM1 富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
CLN6 神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積蛋白CLN6抗體 規(guī)格: 0.2ml
CYP7A1 細(xì)胞色素P450 7A1抗體/7a羥化 規(guī)格: 0.2ml
HE4/Epididymal secretory protein E4 附睪分泌蛋白4抗體 0.2ml
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