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簡要描述:超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法公司正在出售的產(chǎn)品:TTC營養(yǎng)瓊脂 英文名稱:TTC Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 營養(yǎng)肉湯(NB) 英文名稱:Nutrient Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 營養(yǎng)瓊脂(NA) 英文名稱:Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 2216E瓊脂 英文名稱:2216E Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
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實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6399 |
商品介紹:
測定意義: SOD(EC 1.15.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。 測定原理: 通過及氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子(O2-.),O2-.可還原氮藍(lán)四唑生成藍(lán)色甲臜,后者在560nm處有吸收;SOD可清除O2-.,從而抑制了甲臜的形成;反應(yīng)液藍(lán)色越深,說明SOD活性愈低,反之活性越高。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
50T 破傷風(fēng)桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
10 mg DiO(細(xì)胞膜綠色熒光探針) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
250mL Borate Buffer(硼酸鹽緩沖液),0.5M,pH9.0 Borate Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存
1次 96孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法) 96 Microwell Plate PCR Clean-Up Kit 常溫
2 ug pGL5luci pGL5luci 低溫運輸,-20℃保存
麥康凱肉湯 MaConkey Broth 250g
1瓶 HeLa 229細(xì)胞株 HeLa 229 低溫運輸和保存
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬 Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- VancoMycin 10ml*20支/包
10000U 核糖核酸RNase If RNase If -20℃保存
100mL RNase-Free Sodium Acetate Solution(無RNase的乙酸鈉溶液),1M,pH4.5 RNase-Free Sodium Acetate Solution,1M,pH4.5 常溫保存
1 管 EHA103農(nóng)桿菌 EHA103 Agrobacterium Strain -80℃保存
超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法ADAM17/CD156b 瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換 0.1ml
Goat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
DENND2D MAP激激活死亡域蛋白2D抗體 規(guī)格: 0.2ml
MAGEG1/HCA4/NDNL2 黑色素瘤相關(guān)抗原G1抗體(肝相關(guān)蛋白4) 規(guī)格: 0.2ml
HIF 2α 缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗體HIF-2α 規(guī)格: 0.1ml
Cullin 1 Cullin1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-c-Abl(Tyr204) 磷酸化非受體酪激c-Abl抗體 0.1ml
IFI78/MX1 干擾素誘導(dǎo)蛋白P78抗體 規(guī)格: 0.1ml
SLK/Fyn 酪蛋白激Fyn(同步原基因)抗體 規(guī)格: 0.2ml
CASPR/Neurexin4 軸突蛋白4/少突膠質(zhì)細(xì)胞抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM/APC APC標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
PTN/Pleiotrophin 多效生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
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