當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > 熒光定量PCR > 50次黃頭病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
簡要描述:黃頭病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品SMMC-7721人肝癌細(xì)胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS吲哚美辛Indometacin質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR,BP2010RSPO1 Protein Mouse 重組小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 標(biāo)簽)吲哚美辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Indometa
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:黃頭病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
規(guī)格: 50次
貨號:BK-P97080
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
頭孢唑肟,頭孢唑肟酸 Ceftizoxime acid 分子式:C13H13N5O5S2 分子量:383.41
土拉霉素A,托拉菌素A Tulathromycin A 分子式: C41H79N3O12 分子量:806.08
妥布霉素 Tobramycin Base 分子式:C18H37N5O9 分子量:467.51
無活菌素 Nonactin 分子式: C40 分子量:736.94H64O12
西多福韋二水合物 Cidofovir dihydrate 分
過氧化物歧化酶(SOD) Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD) 物理性狀及指標(biāo): 外觀:……………………凍干粉
核糖核酸酶A;RNase A;核糖核酸酶I Ribonuclease A from bovine pancreas 分子量:13.7KD 物理性狀及指標(biāo):
己糖激酶 Hexokinase(Grade I) 物理性狀及指標(biāo): 外觀:……………………白色非晶體粉末
堿性蛋白酶 Protease from Bacillus licheniformis 分子式: 分子量:
堿性0酸酶來源于小牛腸 Phosphate, alkaline Purified Source: Calf Intestine 分子量:140,000 物理性狀及指標(biāo):
皂土5克 小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1RA ELISA Kit
(妥布拉霉素) 魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測試劑盒FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 96T/48T
shēng huà shì jì容量:RT1克 人11β羥類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)免疫試劑盒 Human 11β-HSD1 ELISA kit
4-氧基酚;隊羌基本迷;輕醌單迷隊氧基本酚 4-Mqthoxyphqnol;xy7noinoneonq MonoMqthyl qtqr 120-76-2 英文名稱MouseCCL3ELISAKit小鼠CCL3規(guī)格:96T/48T
離子交換劑Ⅲshēng huà shì jì容量:100克 冰凍切片組織免疫化學(xué)固著溶液10毫升
黃頭病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒氧化金500毫升RT 小鼠脂氧素A4(LXA4)免疫試劑盒 Mouse Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit
71-23-81-1-Propanol; Propanol; Alcohol C3; 豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒 48T
乳酸測試盒(測全血)shēng huà shì jì容量:RT50支/包 HumanPlasmafibronectin,pFNELISA試劑盒人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十六烷基基化銨 Hexadecyltr
注意事項:產(chǎn)品僅用于科研1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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